(1) المبدأ لاساسي     Basic principle

قدر مستوى الحديد في مصل الدم باستخدام الطريقة اللونية (Colorimetric  Method) ، والتي تعتمد على فصل ايونات الحديديك (Ferric Ion) من البروتين الحامل له (Transferrin ) في الوسط الحامضي ذي الدالة الحامضية (4.65) ويختزل ايون الحديدك إلى ايون الحديدوز (Ferrous Ion) ، بعد ذلك يكون ايون
الحديدوز معقد مع الكرموجين (Chromogen) ليعطي كرموفروم ازرق اللون الذي تقاس شدته عند طول موجي (595) نانوميتر باستخدام جهاز المطياف الضوئي .(Williams et al., 1977; Ceriotti & Ceriotti, 1980 ) .

(2) المحاليل المستخدمة Reagents Used

1. الكروموجين         Chromogen

يحتوي على (22.2) ملي مول/لتر من الفيرين (Ferrin) .

2. المواد المختزلة      Reductant

تحتوي على (1.3) مول/لتر حامض الاسكوربيك (Ascorbic acid)

3. المحلول المنظم     Buffer Solution

يتكون من محلول الاستيت المنظم (Acetate Buffer) ذي دالة حامضية (4.65) وسلفوكسايد ثنائي المثيل (Dimethuyl Sulphoxide) ومن (Surfacttant)

4. المحلول القياسي     Standard Solution

يحتوي على (35.8) مايكرومول/لترمن الحديد

(3) طريقة العمل     Procedure

1. تحضير المحلول

أذيب محتويات المواد المختزلة (Reductant) بـ (15) مليلتر من الماء الخالي من ايونات الحديد (Iron-free deionized water) وبقي المحلول مستقرا لمدة اربعة اسابيع بدرجة (4-8) مْ .

2. محلول الاختبار    Test Solution

اضيف (2.0) مليلتر من المحلول المنظم في انبوبة اختبار ، ثم أضيف (0.1) مليلتر من المواد المختزلة (Reductant) ، واضيف (0.5) مليليتر من مصل الدم مع
الرج .

3. المحلول القياسي  Standard Solution

اضيف (2.0) مليليتر من المحلول المنظم في انبوبة اختبار ثانية ، ثم اضيف (0.1) مليليتر من المواد المختزلة (Reductant) ، و اضيف (0.5) مليليتر من المحلول القياسي مع الرج .

​4. محلول الكف        Buffer Solution

اضيف (2.0) مليلتر من المحلول المنظم في انبوبة اختبار ثالثة ، ثم اضيف (0.1) مليليتر من الماء الخالي من ايونات الحديد مع الرج .

مزجت جميع الانابيب بشكل جيد  وقرأت شدة الامتصاصية الأولى لكل من محلول الاختبار والمحلول القياسي مقابل المحلول الكف . ثم اضيف (0.1) مليليتر من الكرموجين للانابيب الثلاثة وبعدها تمزج بشكل جيد وتترك لمدة خمسة دقائق بدرجة (20-25) مْ ثم قرأت شدة الامتصاصية مرة ثانية مقابل محلول الكف .

(4) الحسابات Colculation

تم طرح شدة الامتصاصية الأولى من شدة الامتصاصية الثانية لينتج شدة الامتصاصية الحقيقية لكل من المحلول القياسي ومحلول الاختبار .

وتم حساب كمية الحديد في العينة وفق القانون التي :

 تركيز الحديد = مايكرومول/لتر .