أقرأ أيضاً
التاريخ: 15-12-2016
144
التاريخ: 14-12-2016
147
التاريخ: 20-12-2016
148
التاريخ: 15-12-2016
144
|
تقنية المصفوفات المجهرية – الجزء العملي Microarray technology
البروتوكول العملي لتحضير المصفوفات المجهرية
تشمل الاجزاء الرئيسية لعملية تحضير المصفوفات المجهرية الآتي
- تجري التجارب باستخدام الرنا الكلي total RNA او الرنا المرسال mRNA حيث يتم اجراء عملية العزل والاستخلاص والتقنية .
- تجمع عينتان من الرنا الكلي او المرسال او اكثر لغرض مقارنة مستويات التعبير الجيني .
- تستخدم الشرائح الزجاجية او الاغشية membranes حيث تضاف البقع spots الممثلة للجينات او نسق القراءة المفتوح open reading frame (ORF) على سطوح هذه الشرائح الزجاجية او الاغشية .
- يحضر الدنا المتممة او المكملة الموسومة بصبغة او اثر تفلوري Fluorescently Jabeled c-DNA من نماذج الرنا RNA المعزول بتقنية الاستنساخ العكسي Reverse transcription . اما تجمعات RNA المطلوب مقارنتها فيتم وسمها بمؤشرات متفلورة مختلفة .
- تجري عملية التهجين بين المجسات probes والمصفوفة array
- تغسل المصفوفة للتخلص من المجسات غير النوعية والتي لم تتهجن ثم تخضع المصفوفة للمسح ولمرتين ثم تمسح بالليزرات lasers النوعية للفلروسنت للمؤشر المستخدم .
- الـ c-DNA الموسوم بالصبغة المتفلورة سوف يضيء البقعة التي تهجن فيها مع المجس .
التحليل the analysis
- يمكن قياس شدة التفلور fluorescent intensities من كلا الصورتين التي تم مسحهما . وتستخدم النسبة بين الشدتين لتحديد الجيني النسبي بين هاتين المجموعتين من الخلايا
تستخدم اجهزة متطورة لتصنيع المصفوفات المجهرية والتي تسمى بالـ arrayer (الشكل 1) (a) و (الشكل 1) (b)
الشكل ( a 1) : المؤلف الى جانب وحدة تصنيع المصفوفات المجهرية Microarray
الشكل (b 1) : جهاز تصنيع المصفوفات المجهرية من انتاج شركة BioRad
|
|
مخاطر عدم علاج ارتفاع ضغط الدم
|
|
|
|
|
اختراق جديد في علاج سرطان البروستات العدواني
|
|
|
|
|
مدرسة دار العلم.. صرح علميّ متميز في كربلاء لنشر علوم أهل البيت (عليهم السلام)
|
|
|