المبدأ الأساسي   Basic Principle

قدرت كمية البروتين الكلي باستخدام طريقة بايوريت (Biuret Reagent) ,  التي تتضمن مفاعلة عينة مصل الدم الحاوية على البروتين بمحلول كاشف البايوريت (Biuret Reagent) ليعطي معقدا ذا لون بنفسجي شدته تعتمد عل عدد أواصر الببتيد الموجودة في البروتين الذي يمكن قياس شدته عند طول موجي قدره nm(546) بجهاز المطياف  .⁽¹⁾

الكواشف Reagents

-1 محلول البايوريت:  Biuret Reagent  الذي يحتوي على mmolL  (6) كبريتات النحاسيك (Copper – Sulphate) و(21)mmolL  ترترات الصوديوم – البوتاسيوم
(Potassium – Sodium Tertarate) و  mmolL  (0.75)  هيدروكسيد الصوديوم (Sodium Hydroxide) و mmolL (6) ايويد البوتاسيوم (Potassium Iodide) .

-2 المحلول القياسي  Standard Solution : - يتكون من بروتين ذي تركيز gdl (7.0).

طريقة العمل : Procedure 

أضيف µl (20)  من كل من مصل الدم والمحلول القياسي الى أنبوبتي اختبار تحتوي  (1)ml  من محلول البايوريت . و وضع في أنبوبة اختبار ثالثة محلول الكفء الذي هو (ml)1 من محلول البايوريت . و تم مزج الأنابيب الثلاثة وحفظت بدرجة 37⁰C لمدة (10) دقائق وقرأت شدة الامتصاصية عند طول موجي قدره nm (540)  مقابل محلول الكفء واللون النهائي مستقر لمدة ساعة.

الحسابات : Calculation 

حسب تركيز البروتين الكلي في العينة بوحدة (g / dl) وفق القانون الآتي :

-------------------------------------------------------

1. Falkner   W.R.,  and  Meites   S.  (1982) , "Selected  Methods  of   Clinical Chemistry",   AACC. Washington,  D.C. 9: 319