يتم تحرير البارا - نتروفينيلات بشكل ثنائي الطور

يجري إطلاق أنيون البارا - نترو فينيلات في طورين متميزين (الشكل 10-2): (1) طور «الهبة او الانفجار» (Burst)، ويتميز بتحرر سريع لأنيون البارا - نترو فينيلات؛ (2) وطور لاحق يتميز بإطلاق إضافي أبطأ له. ويمكن فهم وجود هذين الطورين من خلال الاطوار المتتابعة للتحفيز الموضحة في (الشكل 10-3).

الشكل 10-2 :حرائك إطلاق أنيون البارا - نترو فسلات عندما يقوم الكيموتربسين بحلمهة البارا - نترو فينيل أسيتات في جهاز وقف الجريان. ويحسب ((الفينول المتحرر» من الكثافة البصرية لأنيون البارا - نترو فينيلات.

الخطوة البطيئة هي حلمهة مركب الكيموتربسين - أسيتات (CT-Ac):

عند تحول كل جزيئات الكيموتربسين المتوفرة إلى المركب CT-Ac ، فإنه لا يكن أن يحدث نحرير إضافي لأنيون البارا - نترو فينيلات، حتى تتوفر.جزيئات أخرى من الكيموتربسين الار عن طريق النزع البطيء لأنيون الأسيتات من المركب CT-Ac بواسطة الحلمهة (الشكل 10-3). ويوافق طور «الهبة» لتحري البارا — نترو فينيلات (الشكل 10-2) نحول كل جزيئات الكيموتربسين الحر المتوفرة إلى المركب CT-Ac مع التحرير المتزامن لأنيون البارا - نترو فينيلات؛ وينجم الإطلاق اللاحق لأنيون البارا — نترو فينيلات (الغينول؛ PNPA)، الذي يلي طور الهبة، عن التحرير البطيءللكيموتربسين الحر بحلمهة المركب CT-Ac. وبذلك يصبح هذا الكيموتربسين الحر  متوفرا ليشكل من جديد المركبين CT-PNPA و CT-Ac مع ما يرافق ذلك من إطلاق ل PNPA . وفي الواقع، يكون مدى طور الهبة (أي عدد مولات أنيون البارا -نترو فينيلات المتحررة) متناسباً طردا مع عدد مولات الكيموتربسين الموجودة في البداية.

الشكل 10-3 : الخطوات المتوسطة في مفيز حلمهة البارا - نترو فينيل أسيتات بالكيموتربسين (CT = الكيموتربسين؛ PNPA= البارا نترو فينيل أسيتات؛ CT-PNPA = مركب الكمموتربسين - بارا - نترو فينيل أسيتات؛ CT-Ac = مركب الكيموتربسين - الأسيتات؛ الفينول = أنيون البارا - نترو فيتيلات؛ -Ac = أنيون الأسيتات). يتم تشكل المركبين CT-ACT-PNPA بشكل سريع نسبة لحلمهة المركب CT-Ac.