الغرض من الاختبار Purpose

يستعمل اختبار عامل V، X لتمييز انواع بكتيريا Haemophilus. ان تنمية اعضاء اجناس بكتيريا Haemophilus في المختبر تحتاج عوامل نمو مساعدة بعض انواع بكتيريا spp Haemophilus. تحتاج الى عامل X (hemin) فقط او عامل V (نيكوتين امايد ادنين داي نوكليوتايد NAD))( nicotinamide adenine dinucleotide فقط ، او تحتاج الى العاملين معا.

مبدأ الاختبار Principle

يلقح وسط اكار نقيع القلب ، ووسط اكار تربتك الصوياtryptic soy agar، ووسط اکار الهيموفلس agar Haemophilus، او اكار المغذي nutrient agar بالبكتيريا المراد اختبارها بطريقة التخطيط، ثم توضع اقراص او أشرطة مشبعة بـ (X ، V، او XV ) على السطح الوسط الملقح ، وبالسماح للعوامل المكملة بالانتشار الى الوسط الزرعي. سوف تنمو البكتيريا فقط حول القرص الذي يجهزها بالعامل المناسب لنمو البكتيريا .

طريقة العمل Method

1- يعمل عالق بكتيري خفيف ( 0.5 مكفرلاند MacFarland) في محلول ملحي معقم (ملاحظة / عدم وضع عامل X في الوسط الذي اخذت منه البكتيريا وكذلك يستعمل ناقل معدني وليس الماسح القطني فيعمل عالق بكتيري).

 2- يغمر ماسح قطني معقم في العالق البكتيري وينشر على سطح الوسط.Trypticase soy agar

3- توضع اقراص عامل X ,  (Vو XV ) ( على سطح الوسط الاكار وبمسافة (4 - 5 سم ) بين قرص واخر .

4- تحضن بدرجة حرارة (35 - 37 ) م في ظروف هوائية لمدة 24 ساعة

النتائج المتوقعة Expected Results

* النتيجة الموجبة : النمو حول اقراص عامل XV فقط ، تحتاج لكلا العاملين. الشكل((A , النمو حول قرص V ، وعدم نمو حول قرص X ، ونمو خفيف حول قرص XV يدل على احتياجه لعامل V . الشكل (B ) .

* النتيجة السالبة : النمو على سطح الأكار يشير الى عدم الاحتياج الى عامل X او V الشكل (C) .