تقاس نازعات الهيدروجين المعتمدة على +NAD عند الطول الموجي 340 نانومترا (نم)

في التفاعلات التي تشمل +NAD أو +NADP (نازعات الهيدروجين)، تبرز أهمية خاصية+NADH أو NADPH ولكن ليس +NAD أو +NADP المتمثلة في قدرتها على امتصاص الضوء ذي الطول الموجي المساوي لـ 340 نم (الشكل 8-4).

فعند أكسدة NADH إلى ,NAD تتخفض الكثافة البصرية (OD) عتد طول الموجة 340 نم بمقدار يتناسب مع كمية NADH المؤكسدة. وبالمثل، عندما يختزل +NAD تزداد الكثافة البصرية عند 340 نم بمقدار متناسب مع كمية NADH المتشكلة. ويمكن استخدام هذا التغير في الكثافة البصرية عند 340 نم لإجراء التحليل الكمي لأي نازعة هيدروجين معتمدة على +NAD أو +NADP كما يلي: بالنسبة إلى نازعة الهيدروجين التي تحفز أكسدة NADHبواسطة ركيزتها، يكون معدل نقص الكثافة البصرية عند 340 نم متناسبا طرداً مع كميتة الإنزيم. وبالتالي، يسمح قياس معدل انخفاض الكثافة البصرية عند 340 نم باستنتاج كميتة الإنزيم الموجودة في العينة البيولوجية كالمصل أو الخلاصة النسيجية معبرا عنها بوحدات النشاط الإنزيمى.

الشكل 8-4 : أطياف امتصاص ثنائي نوكليوتيد الأدينين والنيوكوتين أميد (+NAD) وثنائي نوكليوتيد الأدينين والنيوكوتين أميد المفسفت (+NADP). الكثافات هنا هي لمحلول تركيزه 44 مجم/ل في حجرة طول مسارها الضوئي يساوي 1 سم. إن أطياف امتصاص ثنائي نوكليوتيد الأدينين والنيوكوتين أميد المفسفت المؤكسد (+NADP) وثنائي نوكليوتيد الأدينين والنيوكوتين أميد المفسفت المختزل (NADPH) مضاهئة لأطياف ثنائي نوكليوتيد الأدينين والنيوكوتين أميد المؤكسد (+NAD) وثنائي نوكليوتيد الأدينين والنيوكوتين أميد المختزل (NADH)، على الترتيب.