الغرض من الاختبار Purpose

يحدد هذا الاختبار وجود فعالية انزيم سايتوكروم الاوكسديز cytochrome oxidase في البكتيريا لتشخيص بكتيريا العائلة المعوية Enterobacteriaceae السالبة لاختبار الاوكسديز وتمييزها عن العصويات الأخرى السالبة لصبغة كرام.

مبدأ الاختبار Principle

يستعمل في تحديد وجود سايتوكروم الاوكسديز البكتيري cytochrome oxidase مستخدما اكسدة المادة الأساس -tetramethyl-p- phenylenediamine dihydrochloride الى indophenols ، وانتاج لون ارجواني غامق كناتج نهائي النتيجة الموجبة تعني (وجود الاوكسديز oxidase) يستدل به بوساطة تغير اللون الى الارجواني الغامق . عدم ظهور اللون يشير الى نتيجة سالبة للاختبار وغياب الانزيم.

طريقة العمل Method

1- ترطب ورقة الترشيح بمادة tetramethyl-p- phenylenediamine dihydrochloride ( 1%)  او استعمال اقراص ورقية متوفرة تجاريا مشبعة بالمادة الأساس .

2- تنقل جزء صغير من المستعمرة البكتيرية (يفضل ان تكون بعمر 24 ساعة) من سطح الاكار باستعمال ناقل معدني من البلاتين او خشبي وتمزج العينة على ورقة الترشيح او القرص التجاري.

3-  ملاحظة تغير اللون الى الازرق الغامق او الارجواني خلال (10 ثواني) في منطقة التلقيح على ورقة الترشيح او الاقراص الورقية.

النتائج المتوقعة Expected Results

* النتيجة الموجبة : تغير اللون الى الارجواني الغامق خلال (10 ثواني ) . الشكل (49 - A).

* النتيجة السالبة : عدم ظهور لون . الشكل (49 - B).

الملاحظات :

* التوقيت بالغ الاهمية في هذا الاختبار

* استعمال أسلاك من سبائك النيكل تحتوي الكروم والحديد (nichrome) لمزج او فرك والصاق المستعمرة البكتيرية على ورق الترشيح ربما تعطي نتيجة موجبة خاطئة .