المرجع الالكتروني للمعلوماتية
المرجع الألكتروني للمعلوماتية

علم الاحياء
عدد المواضيع في هذا القسم 10625 موضوعاً
النبات
الحيوان
الأحياء المجهرية
علم الأمراض
التقانة الإحيائية
التقنية الحياتية النانوية
علم الأجنة
الأحياء الجزيئي
علم وظائف الأعضاء
المضادات الحيوية

Untitled Document
أبحث عن شيء أخر المرجع الالكتروني للمعلوماتية
الرواية من الحفظ والكتب
2024-12-31
الإسناد العالي والنازل
2024-12-31
الوجادة
2024-12-31
الوصيّة
2024-12-31
الإعلام
2024-12-31
شروط كتابة أهمية البحث الإعلامي
2024-12-31

مكافحة أمراض اللافندر
2024-07-21
اشتراط اللبث في الاعتكاف
19-11-2015
التأميم
10-5-2016
الصحافة في مدينة البصرة: فترة الحرب العالمية الأولى
2/12/2022
Stereogenic Nitrogen
27-11-2019
خاتمة حياة قوم معاندين
10-10-2014


استخلاص الDNA والRNA  
  
79   11:22 صباحاً   التاريخ: 2024-12-29
المؤلف : أ.د. علي حمود السعدي
الكتاب أو المصدر : مدخل الى تطبيقات الهندسة الوراثية في الطب العدلي
الجزء والصفحة : ص119-121
القسم : علم الاحياء / الأحياء الجزيئي / مواضيع عامة في الاحياء الجزيئي /


أقرأ أيضاً
التاريخ: 7-4-2021 1785
التاريخ: 2-6-2018 2066
التاريخ: 9-12-2015 3049
التاريخ: 14-10-2020 1644

لا بد وفي أية تجربة يستخدم فيها الجين من الحاجة إلى مصدر يُستخلص منه الحامض النووي سواء كان DNA أو RNA، وتتضمّن الخطوة الأولى في عملية الاستخلاص تفتيت المادة الأولية سواء كانت فايروسية أو بكتيرية أو فطرية أو نباتية أو حيوانية، ولتجنّب تضرر الأحماض النووية المراد استخلاصها، يُفضّل استخدام الإنزيمات المحللة للجدار الخلوي (فيما يتعلق بالخلايا الحاوية على الجدار مثل الخلايا النباتية)، مع استعمال المنظفات الكيمياوية المحللة للأغشية الخلوية. هذا ويُراعى عند الضرورة استخدام طريقة أكثر قساوة في سبيل تمزيق الخلايا (كما هو الحال لبعض الأجزاء النباتية)، إذ إنه قد يتعرّض الـDNA للتقطيع، الأمر الذي قد يعيق إنتاج الجزيئات التركيبية النموذجية.

بعد عملية تمزيق الخلايا يتم التخلّص من البروتينات بالفينول أو خليط الفينول كلوروفورم مع الطرد المركزي، لتتجمّع الجزيئات البروتينية في طبقة الفينول الوسطى، وتتجمّع الأحماض النووية في الطبقة العليا للمحلول والتي يتم ترسيبها فيما بعد باستخدام الآيزوبروبانول (Isopropanol) أو الإيثانول المبرد خلال الطرد المركزي. في حالة استخلاص الـDNA يُستخدم الإنزيم Ribonuclease) RNase) للتخلّص من الRNA، أما في حالة استخلاص الmRNA بهدف تصنيع الDNA المكمّل (cDNA) فيتم استخدام أعمدة السليلوز المربوط مع سلاسل الثايمين القصيرة Oligo(dT)-cellulose التي ترتبط مع الذيل متعدّد الأدنين (Poly-A) الموجود في خيوط mRNA ، إذ يُعطي هذا الأسلوب كمية كبيرة من الmRNA ويُزيل أغلب المخلفات العالقة به  .

هذا ويستخدم الطرد المركزي فائق السرعة (Ultracentrifugation) لتحضير ال DNA البلازميدي باستخدام محلول كلوريد السيزيوم( CsCl) Cesium chloride  متدرّج الكثافة، وبعد فترة تصل إلى 48 ساعة يتكثف الـDNA البلازميدي ويكون طبقة في مكان محدد في أنبوبة الاختبار، إذ تؤخذ هذه الطبقة ويتم التخلص من بقايا كلوريد السيزيوم من أجل الحصول على DNA نقي.




علم الأحياء المجهرية هو العلم الذي يختص بدراسة الأحياء الدقيقة من حيث الحجم والتي لا يمكن مشاهدتها بالعين المجرَّدة. اذ يتعامل مع الأشكال المجهرية من حيث طرق تكاثرها، ووظائف أجزائها ومكوناتها المختلفة، دورها في الطبيعة، والعلاقة المفيدة أو الضارة مع الكائنات الحية - ومنها الإنسان بشكل خاص - كما يدرس استعمالات هذه الكائنات في الصناعة والعلم. وتنقسم هذه الكائنات الدقيقة إلى: بكتيريا وفيروسات وفطريات وطفيليات.



يقوم علم الأحياء الجزيئي بدراسة الأحياء على المستوى الجزيئي، لذلك فهو يتداخل مع كلا من علم الأحياء والكيمياء وبشكل خاص مع علم الكيمياء الحيوية وعلم الوراثة في عدة مناطق وتخصصات. يهتم علم الاحياء الجزيئي بدراسة مختلف العلاقات المتبادلة بين كافة الأنظمة الخلوية وبخاصة العلاقات بين الدنا (DNA) والرنا (RNA) وعملية تصنيع البروتينات إضافة إلى آليات تنظيم هذه العملية وكافة العمليات الحيوية.



علم الوراثة هو أحد فروع علوم الحياة الحديثة الذي يبحث في أسباب التشابه والاختلاف في صفات الأجيال المتعاقبة من الأفراد التي ترتبط فيما بينها بصلة عضوية معينة كما يبحث فيما يؤدي اليه تلك الأسباب من نتائج مع إعطاء تفسير للمسببات ونتائجها. وعلى هذا الأساس فإن دراسة هذا العلم تتطلب الماماً واسعاً وقاعدة راسخة عميقة في شتى مجالات علوم الحياة كعلم الخلية وعلم الهيأة وعلم الأجنة وعلم البيئة والتصنيف والزراعة والطب وعلم البكتريا.