مزرعة بول Urine Culture

كيفية عمل مزرعة البول واختيار المضاد الحيوي المناسب :

لعمل مزرعة بول يجب مراعات ما يلي :

أولاً : التعليمات :

1. يجب ان يمتنع المريض عن أخذ اي مضاد حيوي لمدة 48 ساعة .
2. يجب إعطاء المريض عبوة معقمة حتى يجمع بها البول ، ويفضل أول بول صباحاً .
3. يغسل المريض يديه بالماء والصابون وأيضاً منطقة الحوض ثم ينشفها .
4. يترك أول قطرات من البول ويقوم بتجميع البول حتى نصف العبوة .
5. يتم إحضار العينة للمعمل في أقل من 15 دقيقة .

ثانياً : عمل المزرعة :

1. يتم إزالة الـ nutrent agar في حمام مائي .
2. صب الميديا في الطبق تحت ظروف معقمة (بجوار لهب) .
3. انتظر حت تتصلب في الطبق .
4. اغمر سواب معقمة في عينة البول ثم امسح طبق الاجار بها .
5. خضن (اي ضع طبق الاجار في الحضانة) لمدة 24 ساعة في الحضانة عند 36 درجة مئوية .
6. لو نمت البكتريا . . . إذا ستكمل الاختبار بعمل اختبار الحساسية وتحديد نوع البكتريا . واذا لم تنمو ستكون نتيجة المزرعة سلبية .
7. تأخذ مسحة من البكتريا وتذوبها في انبوبة بها ماء معقم . . وترج حتى تذوب وتعكر الماء وهذا يسمى بالـ .(spore suspension)
8. تحضر طبق اجار كالسابق .
9. تصب الـ spore suspension في الطبق بشكل متجانس حتى يملئ كل الطبق بشكل متساوي .
10. تنتظر حتى يجف قليلاً .
11. تقوم بغرس 14-18 ديسك من المضادات الحيوية بواسطة الماسك الخاص بهم 
12. تحضن لمدة 24 ساعة اخرى ثم تسجل أكبر inhibition zone وتقسم المضادات الحيوية الى ثلاث مجموعات sensitive - less sensitive - resitant

13- قبل ذلك تأخذ مسحة من عينة البكتريا بالطبق الأول وتقوم بصبغها كما بالشكل

أهم شيء في صبغة الجرام هو تحديد :

1- gram -Ve or +Ve

2- شكل البكتريا أما Cocci or Bacilli . . .

أكيد طبعاً كلنا سمعنا عن تحليل Sensitivity test

وأكيد كلنا سمعنا أو اتى لنا أشخاص الصيدلية وقالوا لنا " أنا عملت مزرعة "

المزرعة تعني ببساطة أننا نوفر الظروف المناسبة للبكتريا حتى تنمو ليتم اختيار افضل مضاد حيوي يؤثر فيها sensitivity على أن يتم كل هذا Under aseptic condition

ويتم ذلك بأخذ عينة من المكان المتوقع ان يكون فيه نمو بكتيري . . . مثال على ذلك " مزرعة البول " وهذا يتم عمله في الناس التي يشك الطبيب ان عندهم Urinary tract infection

أيضا في حالات الـ genital infection يتم أخذ مسحة من الإفرازات الناتجة كما في حالة مرض السيلان Gonorrhea .

أيضا في حالة الـ Tonsilitis أو Pharyngitis يتم أخذ مسحة من الزور Throat swab وتنميتها في ظروف مناسبة واختيار المضاد الحيوي المناسب .

صورة التحليل هذه تكون عبارة عن مجموعة من المضادات الحيوية وامام كل مضاد حيوي قوته في قتل البكتريا ويرمز لها بالرمز بلس ++++

مثل هذه صورة تحليل لمزرعة وهي عينة مأخوذة من الحلق Throat swab

- لاحظ ان مجموعة الـ quinolones تحتل مرتبة الصدارة اي انها اذا استخدمت في هذه الحالة فستكون النتيجة ايجابية وسريعة في القضاء على البكتريا في اسرع وقت . . . يليها الـ azaithromycin ثم الـ cephalexin وهكذا كما هو مشار اليها بالرمز ++

- لاحظ ايضا ان البكتريا المسببة لالتهاب الحلق هي بكتريا من نوع Gram positive

- هذه النتيجة خاصة بالحالة التي معنا وليس نتيجة عامة يعني كل حالة يكون لها نتائج خاصة بها لأنه لا يصح ان نطبق هذه النتيجة على اي حالة تأتي لنا .

ما هي فائدة تحليل المزرعة ؟؟

فائدته الاساسية هي اختيار اقوى مضاد حيوي للحالة وبالتالي نتجنب اعطاء المريض مضادات حيوية لا تؤثر في البكتريا المصاب بها وبالتالي التقليل من مقاومة البكتريا Resistant والتقليل أيضاً من الاعراض الجانبية التي سوف تنتج اذا اخترنا مضادات حيوية بطريقة عشوائية .

يعني مثلا في الحالة التي معنا هذه ممكن الطبيب يكتب أي مضاد حيوي بدون عمل مزرعة مثلا يكتب للمريض علبة Unasyn كبسولة كل 12 ساعة او يعطي له يوناسين حقن ، طبعاً لو نظرت الى نتيجة اليوناسين في المزرعة سوف ترى ان البكتيريا Resistant أصلا لليوناسين بمعنى انه لن يأتي بنتيجة .

بالنسبة للمضادات الحيوية الثلاثة التي في اول التحليل . . . كلهم سوف يعطوا نفس النتيجة لو تم استخدامهم حيث كلهم ++++ وترتيبهم في التحليل غير مهم بالنسبة لنا لكن المهم ان نتيجتهم واحدة لو تم استخدامهم في علاج هذه الحالة .

أما بالنسبة للـ AZITHROMYCIN فترتيبه الثاني بعد مجموعة الكينولونز أي تأثيرة أقل من تأثير مجموعة الكينولونز على البكتريا في الحالة التي معنا .

والصورة الآتية لكي توضح لنا كيف يتم تحديد قوة المضاد الحيوي في المزرعة :

هذا الطبق يحتوي على الوسط المناسب للبكتريا التي تم أخذها من الحلق ، الأقراص الصغيرة هي أقراص تحتوي على أنواع مختلفة من المضادات الحيوية - لكن طبعاً ليست أقراص من الصيدلية بل هي أقراص خاصة لهذا الموضوع .

الـ clear zone هي المنطقة التي استطاع المضاد الحيوي أن يمنع نمو البكتريا فيها وكلما اتسعت هذه المنطقة كلما كان المضاد الحيوي أكثر تأثيراً علي البكتريا كثير من الحالات يصرف فيها الدكتور مضاد حيوي دون اللجوء لهذا الاختيار . . . 

وهذا هو السائد ان الطبيب يصف المضاد الحيوي إما عشوائياً أو يخمن نوع البكتريا التي تسبب المرض ويصف لها المضاد الحيوي لكن طبعاً ممكن تكون حالة محتاجه علاج سريع وبالتالي ليس هناك وقت الطبيب بضيعه لكي يعمل المزرعة . والأفضل هو أن يكتب الطبيب للمريض مضاد حيوي حتى يقوم المريض بعمل مزرعة و حينئذ يغير الطبيب نوع المضاد الحيوي ويصف الأكثر تأثيراً من خلال نتيجة المزرعة .

ملحوظة :

كما يجب ان نفرق بين أمرين هامين جداً وهما :

Culture is done to find out what kind of organism (usually a bacteria) is causing an illness or infection .

Sensitivity test checks to see what kind of medicine, such as an antibiotic, will work best to treat the illness or infection .

ومن هنا نستنتج أن علينا عمل الزراعة بداية للتعرف على البكتريا المسببة للمرض ومن ثم عمل اختبار الحساسية فربما كانت النتيجة أكثر من ميكروب وهنا يلزم اعطاء تركيبة دوائية .

أما بالنسبة للعينات التي يمكن الزراعة منها فهي كثيرة :

A culture and sensitivity test may be done on many different body fluids, such as (Urine - Stool- Mucus - Pus- Saliva- Breast milk- Spinal Fluid - Blood -Discharge from the vagina- Discharge from the penis) .

واحب أن انوه بأن هذه الطريقة بالرغم من كونها نوعاً ما بدائية إلا أنها هي التي تحدد نوع المضاد الحيوي المناسب لنوع معين من البكتريا . بمعنى نعتمد على رصد أبحاثنا وتطوير إختيارات المضادات على حسب هذا التحليل الذي نسميه نحن Minimum inhibitory concentration أو Minimum bactericidal concentration >>> MBC

والمضاد الحيوي الذي استخدمه لعمل اختبار على الميكروب يحضر بطريقة معينة . . . . وتركيزات تسمح لنا نحن من نعمل بالمختبر بالقدرة على رصد النتائج بسهولة . وبالطبع بعد الحصول على النتيجة التي أريدها الا وهي أقل تركيز من هذا المضاد الذي يعمل على منع نمو البكتيريا مرة أخرى . . . . وأخذ أقل تركيز وليس أعلى وذلك حتى أقلل من تأثير المضاد على جسم الإنسان وفي نفس الوقت أضمن فعاليته . . .

ولكم ملحوظة :

أذا كنت أريد أن المزرعة تعطيني نتيجة 100 % لأطبقها على الإنسان فلا أعمل هذا الاختبار على أجار وإنما اعمله على Broth أي سائل معين يسمح بنمو البكتيريا ومنه أرى النتيجة ؟؟؟

تتساءلون لماذا سائل وليس أجار حتى أحاول التقريب من حالة جسم الإنسان بمعنى عند عمل الاختبار في وسط سائلي كجسم الإنسان (البلازما والدم) سيعطيني نتيجة تكاد تكون مثالية عندما أطبقها على جسم الإنسان فعلياً ، لذلك نتعمد في أبحاثنا على العمل في Serial dilution test لإعطاء نتيجة المزرعة .