المبدأ الاساسي Basic Principle 

استخدمت في تقدير فعالية  إنزيم  الفوسفاتيز القاعدي طريقية إنزيمية , والتي تتضمن اضافة فوسفات الفنيل (Phenyl phosphate) وهي المادة الاساس (Substrate) التي يعمل عليها إنزيم  الفوسفاتيز القاعدي في مصل الدم ويحضن التفاعل لمدة ربع ساعة في درجة حرارة (37) °C  درجة مئوية ويعمل الإنزيم  على تحويل فوسفات الفنيل إلى الفينول  (Phenol) الذي يمكن الكشف عنه وتقديره كمياً وذلك باضافة المحلول 4- امينوانتي بايرين (4-amino-antipyrin) وبوجود Alkaline potassium ferricyanide والذي يكون معقداً احمر اللون يعرف بالكينون والذي يمكن قراءة الامتصاصية له عند طول موجي nm  (510) .⁽¹⁾

الكواشف Reagents

-1 محلول مادة الاساس المنظم Substrate Buffer Solution :- يحتوي على فوسفات الفنيل الثنائية  الصوديوم    (Disodium phenylphosphate)   بتركيز   (5)  mmolL  مع   محلـــــول (Carbonate - bicarbonate) بتركيزmmolL  (50)  وفي دالة حامضية (pH=10).

-2 المحلول القياسي Standard Reagent :- يحتوي على الفينول (phenol) ويكافئ  (20)  وحدة كايند-كنك .

-3 المحـلول المثبط BLoking  Reagent :- يحتوي على 4- امينو انتــي بايريـــــن  (4-amino-antipyrine)  بتركيزmmolL (60) بالاضافة لاحتوائه على ارسينات الصوديوم (Sodium arsenate) بتركيز gL  (75)  .

-4 المحلول الملون dye Reagent :- يحتوي على سيانيد البوتاسيوم الحديديكي (Potassium  ferricyanide) بتركيز mmolL    (150)  .

طريقة العمل Procedure

تم وضع في ثلاثة انابيب اختبار  ml (2) من المادة الاساس , ووضعت الانابيب في الحمام المائي بدرجة  °C (37)  لمدة  (5)  دقائق ، ثم أضيف µL  (50)  من المحلول القياسي ومصل الدم والماء المقطر واعيدت الانابيب إلى الحمام المائي وبدرجة الحرارة نفسها ولمدة  (15)  دقيقة ، ثم أضيف إليها  (0.5) ml  من المحلول المثبط وتمزج جيداً ويضاف بعدها   ml(0.5) من المحلول الملون . ووضعت جميع الانابيب في مكان مظلم ولمدة (10) دقائق بعدها سجلت الامتصاصية للعينات عند طول موجي قدره nm   (510)  مقابل المحلول الكفء .

الحسابات Calculations

تم حساب فعالية إنزيم الفوسفاتيز القاعدي بوحدة كايندكنك (Kind and King)  وحسب العلاقة الاتية :

وحدة كايندكنك (Kind and King) : وهي الوحدة التي تحرر mg (2)  من الفينول خلال  (15)  دقيقة تحت ظروف التفاعل من درجة حرارة °c  (37)  ودالة حامضية (pH= 10-9.6)  .

يتم قياس النتيجة بلوحدة الدولية 1UL  = النتيجة بوحدة كايندكنك (Kind and King)  7.09 X

-----------------------------------------------------

1. Belfield A. and Goldberg D. M. (1971)," Revised assay for serum    phenylphosphatase activity using 4-amino-antipyrine, Enzyme", 12:    561-573.

اخر الاخبار

اخبار العتبة العباسية المقدسة

بمشاركة الأمين العام للعتبة العبّاسية المقدّسة.. موكب عزاء السادة الخَدَم يحيي ليلة عاشوراء

صحفيّون يشيدون بالتسهيلات الإعلامية التي تقدّمها العتبة العباسية المقدّسة خلال زيارة عاشوراء

أهالي كربلاء ينظّمون مسيرة الشموع الحسينية إحياءً لليلة العاشر من شهر المحرّم

عبر مجلس عزاء.. العتبة العباسية المقدّسة تحيي ليلة اليوم العاشر من المحرّم

المزيد

الآخبار الصحية

لهذا السبب.. إغلاق 25 مركزًا لعلاج الإدمان في مصر ؟

خلافا للاعتقاد الشائع.. علماء يكشفون أسرار بذور البطيخ ؟!

هذا ما يحدث لجسمك عند تناولك الطماطم بانتظام !

تعرف على أطعمة تسرّع "تعافي الجسم" من حروق الشمس

المزيد

الآخبار التكنلوجية

الثلوج تغطي الصحراء الأكثر جفافا في العالم!

بتلسكوب "ألما".. التقاط صورا غير مسبوقة لبدايات الكون !

هل هاتفك مراقب؟.. 5 علامات خطيرة تكشف التجسس عليك

دبي تطلق أول رحلة تجريبية للتاكسي الجوي

المزيد

مواضيع ذات صلة

تحضير اصباغ الازو

تحضر الجالكونات

تحضير معقد [Zn(C10H9O3N2)2]

تحضير معقد [Mn(C10H9O3N2)2]

تحضير قاعدة شيف

تحضير مادة فنيل هيدرازايد (Phenyl hydrazide)

تحضير محلول هيدروكسيد الصوديوم بتركيز %20

تحضير محلول ثنائي مثيل كلايوكسيم(DMG) بتركيز %1

تحضير محلول هيدروكسيل امين هايدروكلوريد بتركيز% 20

تحضير محلول سيانيد البوتاسيوم بتركيز %10

تحضير محلول ترترات الصوديوم بوتاسيوم بتركيز%20

تحميل المادة الدوائية ألامبسلين على البوليمر