ارشادات عامة عند تحضير بيئة زراعة الانسجة النباتية
المؤلف:
أ.د. محمود توفيق شرباش
المصدر:
اساسيات زراعة الانسجة النباتية
الجزء والصفحة:
ص 96-97
2025-10-31
27
ارشادات عامة عند تحضير بيئة زراعة الانسجة النباتية
1- تحضر محاليل مركزة من جميع الأملاح المعدنية والفيتامينات ومنظمات النمو والهرمونات التي تدخل في تركيب البيئة الغذائية (الجداول التالية). ويفضل ترشيح هذه المحاليل باستخدام ورق ترشيح رقم (3) قبل حفظها.
وتحضر العناصر الكبرى والصغرى كل على حدة بكميات تكفي مستقبلا لعدة تحضيرات من البيئة وتخزن هذه المحاليل في ظلام في غرفة عادية. ويوجد في الأسواق مخلوط من العناصر الكبرى والصغرى سابقة التجهيز وتسمى تجاريا MS- salts على أن تتبع الإرشادات المسجلة على العبوة لتجنب بعض المشاكل مثل سرعة الترسيب.
جدول (1) محتوى بعض البيئات الغذائية الهامة من الايونات
جدول (2) محتوى بعض البيئات الغذائية الهامة من العناصر الكبرى (ممليجرام / لتر)
جدول (3) محتوى بعض البيئات الغذائية الهامة من العناصر الصغرى (ملليجرام/ لتر)
جدول (4) محتوى بعض البيئات الغذائية من العناصر الكبرى
جدول (5) محتوى بعض البيئات الغذائية من العناصر الصغرى
2- تحفظ المحاليل المركزة بعيدا عن الأتربة ومصادر التلوث عند 2 - 4 م، مع مرعاة عدم تكوين رواسب أو تغيير لونها. ويجب استخدام هذه المحاليل في فترة لا تزيد عن 30 يوما.
3- تجزأ محاليل الفيتامينات ومنظمات النمو المركزة في أنابيب اختبار تحتوي كل أنبوبة على القدر المطلوب إضافته للبيئة عند تحضيرها ثم تخزن الأنابيب عند (20 م) لحين وقت استعمالها لضمان سلامة محتوى الأنابيب من التلوث. وتحفظ المحاليل المركزة لإندول حمض الخليك (IAA) في مكان مظلم عند 2 - 4 م.
4- تضاف خلاصة الخميرة والسكر والإنزيمات إلى البيئة عند تحضيرها. ويضاف 0,6-1 % اجار عند تحضير البيئة الصلبة، ويفضل أن يكون الآجار على هيئة مسحوق.
5- يرشح لبن جوز الهند عقب استخراجه من الثمار ثم يعقم بالأوتوكلاف ويحفظ عند (20 م) لسرعة فساده.
6- قبل تعقيم المركبات سريعة التلف بالأوتوكلاف يفضل ترشيحها أولا باستخدام ورق ترشيح رقم (3) ثم تعقم باستخدام مرشحات التعقيم Millipore MF filters مسامية (mµ 0.22) . وعند ترشيح المحاليل المخففة جدا من منظمات النمو خلال مرشحات التعقيم يفضل التخلص من الكمية الأولى من الراشح لاحتمال إدمصاص جزء من الهرمون على سطح المرشحات مما يسبب انخفاض تركيزه.
7- تكتب جميع البيانات على الأواني المحتوية على المحاليل مثل اسم المادة وتركيزها وتاريخ التحضير وأي بيانات تضمن سلامة المحاليل واستخدامها قبل فسادها وفقد جودتها.
8- إذا كان المطلوب استخدام بيئات صلبة أو سائلة مثل البيئات المستخدمة في زراعة الأجنة فتوضع أنابيب الاختبار على مسطح مائل عقب تعقيمها واستخراجها من الأوتوكلاف عند 45 - 50 م.
9- يستخدم ماء خالٍ من الأيونات De-ionized water بدلا من استخدام مياه الصنبور لارتفاع محتواه من أيونات الكالسيوم الذي يترسب في قاع الأوتوكلاف.
10- يجب تحديد زمن التعقيم ودرجة الحرارة اللازمة للتعقيم. وقد تستخدم بكتيريا Bacillus stearothermo-phillis كدليل بيولوجي للتعرف على سلامة التعقيم حيث تموت بعد 12 - 15 دقيقة من التعقيم عند 121 م.
الاكثر قراءة في الزراعة النسيجية
اخر الاخبار
اخبار العتبة العباسية المقدسة
