تاريخ الكيمياء والعلماء المشاهير

التحاضير والتجارب الكيميائية

المخاطر والوقاية في الكيمياء

اخرى

مقالات متنوعة في علم الكيمياء

كيمياء عامة

الكيمياء التحليلية

مواضيع عامة في الكيمياء التحليلية

التحليل النوعي والكمي

التحليل الآلي (الطيفي)

طرق الفصل والتنقية

الكيمياء الحياتية

مواضيع عامة في الكيمياء الحياتية

الكاربوهيدرات

الاحماض الامينية والبروتينات

الانزيمات

الدهون

الاحماض النووية

الفيتامينات والمرافقات الانزيمية

الهرمونات

الكيمياء العضوية

مواضيع عامة في الكيمياء العضوية

الهايدروكاربونات

المركبات الوسطية وميكانيكيات التفاعلات العضوية

التشخيص العضوي

تجارب وتفاعلات في الكيمياء العضوية

الكيمياء الفيزيائية

مواضيع عامة في الكيمياء الفيزيائية

الكيمياء الحرارية

حركية التفاعلات الكيميائية

كيمياء الكم

الكيمياء الكهربائية

الكيمياء اللاعضوية

مواضيع عامة في الكيمياء اللاعضوية

الجدول الدوري وخواص العناصر

نظريات التآصر الكيميائي

كيمياء العناصر الانتقالية ومركباتها المعقدة

مواضيع اخرى في الكيمياء

كيمياء النانو

الكيمياء السريرية

الكيمياء الطبية والدوائية

كيمياء الاغذية والنواتج الطبيعية

الكيمياء الجنائية

الكيمياء الصناعية

البترو كيمياويات

الكيمياء الخضراء

كيمياء البيئة

كيمياء البوليمرات

مواضيع عامة في الكيمياء الصناعية

الكيمياء الاشعاعية والنووية

تنقية الفوسفاتير القاعدي ALP

المؤلف: أ.د. سامي عبد المهدي المظفر

المصدر: الكيمياء السريرية

الجزء والصفحة: ص 361

15-3-2021

1445

تنقية الفوسفاتيز القاعدي ALP

اتبعت عدة طرق في تنقية ALP باستخدام مواد وتقنيات متعددة، فقد تم تنقية

الأنزيم لأول مرة باتباع طريقة التجزئة والترسيب بواسطة الاستيون حيث استخلص الأنزيم من أمعاء العجل وبدرجة تنقية عالية وهي ٨٦١ مرة. ومن الطرق الأخرى المتبعة في تنقية ALP هي الترسيب باستخدام كبريتات الأمونيوم وذلك باستخدام تراكيز متدرجة من الملح ويهدف ذلك إلى ترسيب البروتينات الموجودة مع الأنزيم. فقد تم تنقية الأنزيم باستخدام تركيز 80 % من الملح NH₄)₂ SO₄).

تعد طريقة كروموتوغرافيا العمود من الطرق الحساسة المتبعة في تنقية الأنزيمات حيث اعتمدت في الكثير من الدراسات الانزيمية. وقد تطورت هذه التنقية باستعمال السيفادكس Sephadex والسفروز Sepharose فقد تم تنقية الأنزيم باستخدام السفروز 6B - اء - Sepharose وذلك بدرجة تنقية 19 مرة. وكذلك تمت تنمية الفوسفاتير القاعدي المشيمي بأربع خطوات متتالية وذلك باستخدام البيوتانول في الخطوة الأولى و كردموتوغرافيا العمود في الخطوة الثانية وباستخدام Q-Sepharose كمادة لتعبئة العمود ، وفي الخطوة الثالثة استخدمت نفس التنقية لكن باستخدام -Concavalin A Sepharose وفي الخطوة الرابعة والأخيرة استخدام Q-Sepharose مرة أخرى. وكذلك تم تنقية الأنزيم المشيمي لكن بخطوتين فقط باستخدام تنقية كرموتوغرافيا العمود باستخدام Concavaiin في الخطوة الأولى وباستخدام Q-sepharose في الخطوة الثانية.

كذلك تمت تنقية ALP من نسيج ثدي البقر الحلوب وبدرجة تنقية1400 مرة ،

وتمت التنقية بأربع خطوات باستخدام Concavalin-A في الخطوة الأولى ثم -DEAE Cellulose في الخطوة الثانية يتبعها DEAESepharose في الخطوة الثالثة واخيرا SephadeG200 في الخطوة الرابعة.